几种甲型H1N1流感病毒SYBR Green Ⅰ荧光RT-PCR检测方法的验证

• 作者: 周广彪 朱俊贤 蔡翁义 蔡颖 魏锐 黄琦容
• 来源期刊: 口岸卫生控制
• 学科: 医学
• 关键词: SYBR Green Ⅰ荧光RT-PCR 甲型H1N1流感病毒 检测 验证
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 28-33
• 页数: 6页
• 分类号: R373.1
• 字数: 4035字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-5777.2013.06.009

摘要

目的 比较和验证5种甲型H1N1流感病毒SYBR Green Ⅰ荧光RT-PCR检测方法.方法 首先使用美国NCBI网站的Primer-BLAST程序验证5种甲型H1N1流感病毒SYBR GreenⅠ荧光RT-PCR检测方法引物的理论特异性,然后使用猪流感H1N1病毒核酸、2009年新甲型H1N1流感病毒核酸、H5N1禽流感核酸、能力验证样品作为试验样品验证方法的实验特异性.结果 理论验证结果显示5对来源于文献的引物均适合于猪流感的检测,前3对可用于新型甲型H1N1流感的检测,但只限于个别来源的毒株,与预期略有差别.实验验证结果显示,方法1可正确检出甲型流感病毒;方法2可正确检出猪流感H1N1亚型病毒、新甲型H1N1流感病毒核酸;方法3检测新甲型H1N1流感核酸时未获得阳性结果;方法4可以正确检测出猪流感H1病毒核酸;方法5可以正确检测出猪流感H1N1病毒核酸,但检测新甲型H1N1流感核酸、禽流感H5N1核酸时也为阳性.结论 方法1可用于猪甲型流感和新甲型H1N1流感病毒的初筛;方法2可用于猪流感H1N1亚型病毒和新甲型H1N1流感病毒核酸的初筛;方法3不适合新甲型H1N1流感病毒核酸的检测;方法4可用于猪流感H1亚型的检测;方法5不适合于猪流感H1N1亚型病毒的检测.采用SYBRGreen Ⅰ荧光RT-PCR方法检测甲型H1N1流感病毒核酸,特异性普遍不十分理想,只能用于初筛检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡翁义		6	7	2.0	2.0
2	周广彪	汕头出入境检验检疫局技术中心	26	44	4.0	4.0
3	魏锐		2	2	1.0	1.0
4	朱俊贤		4	6	2.0	2.0
5	蔡颖		1	2	1.0	1.0
6	黄琦容		1	2	1.0	1.0