H5N1虎源流感病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及临床应用

• 作者: 侯小强 夏咸柱 王铁成 薛琳 高玉伟
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: H5N1虎源流感病毒 荧光定量RT-PCR 检测方法
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: S8
• 字数: 3719字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-5130.2006.09.001

摘要

根据本室分离获得的虎源H5N1流感病毒的HA基因序列测定结果,结合GenBank中报道的H5亚型禽流感病毒HA基因序列进行同源性比较分析,选择保守序列区作为扩增区域,利用Primer 5.0引物设计软件和BLAST软件程序设计出特异性扩增引物.采用成本较低、不需要特异探针引物、优化周期短,能区分病毒变异株的SYBR Green I随机掺入法建立定量PCR反应体系,并对反应条件进行优化.试验结果表明应用该方法对虎源H5流感病毒的检测具有高度的特异性,检测的灵敏度为101～102拷贝数.对20份病死老虎临床病料和24份人工感染的小鼠脏器病料用荧光定量RT-PCR方法、常规RT-PCR方法和病毒分离方法进行检测,荧光定量RT-PCR方法检测结果略高于常规RT-PCR方法,但与病毒分离方法结果相一致.这说明荧光定量RT-PCR方法可以对临床上H5N1虎源流感病毒检测提供参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏咸柱	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	59	634	15.0	23.0
2	高玉伟	吉林大学畜牧兽医学院	21	197	6.0	14.0
4	薛琳	吉林大学畜牧兽医学院	4	54	3.0	4.0
5	王铁成	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	10	15	3.0	3.0
6	侯小强	吉林大学畜牧兽医学院	6	31	4.0	5.0