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摘要:
目的 构建表达VEGF-A的短发夹RNA真核表达载体,并通过其介导的RNA干扰作用,研究对人神经母细胞瘤细胞株IGR-N-91细胞中VEGF-A的mRNA表达的影响.方法 根据VEGF-A的cDNA序列合成两对寡核苷酸片段,退火后分别插入真核表达载体组成重组质粒.对重组质粒进行PCR、测序鉴定验证后,经Western Blot筛选RNA干扰效果最佳的质粒,然后将该质粒转染人神经母细胞瘤细胞株IGR-N-91.转染48 h后提取总RNA,逆转录为CDNA,经RT-PCR半定量检测VEGF-A mRNA的表达水平.结果 成功构建含有VEGF-A的RNA干扰片段真核表达载体,经Western Blot筛选后分别得到RNA干扰效果最佳的片段.RT-PCR结果表明质粒转染人神经母细胞瘤后VEGF-A的mRNA的表达升高.结论 成功构建含有人VEGF-A的RNA干扰片段的真核表达载体,该重组质粒转染人神经母细胞瘤IGR-N-91细胞后VEGF-A的mRNA表达升高.
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内容分析
关键词云
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文献信息
篇名 RNA干扰对神经母细胞瘤细胞VEGFA的mRNA表达的影响
来源期刊 临床小儿外科杂志 学科
关键词 神经母细胞瘤 血管内皮生长因子A
年,卷(期) 2013,(6) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 471-474
页数 4页 分类号
字数 2744字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1671-6353.2013.06.012
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 周小渔 湖南省儿童医院普外一科 62 257 9.0 12.0
2 刘朝阳 湖南省儿童医院普外一科 38 125 6.0 9.0
3 张雁冰 湖南省儿童医院普外一科 9 21 3.0 4.0
4 卢其 湖南省儿童医院普外一科 1 0 0.0 0.0
传播情况
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研究主题发展历程
节点文献
神经母细胞瘤
血管内皮生长因子A
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
临床小儿外科杂志
月刊
1671-6353
43-1380/R
大16开
湖南省长沙市梓园路86号(湖南省儿童医院内)
42-261
2002
chi
出版文献量(篇)
4099
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6
总被引数(次)
11604
论文1v1指导