RNA干扰下调SPHK1基因表达抑制胃癌细胞增殖

• 作者: 夏金堂 张娈景 张珑涓 李雯 简卫华 赖越元 陈连周 黄晓卉
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 鞘氨醇激酶1 胃癌细胞 细胞增殖 Akt
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 321-325
• 页数: 5页
• 分类号: R735.2
• 字数: 3397字
• 语种: 中文

摘要

[目的]应用RNA干扰方法下调鞘氨醇激酶1(SPHK1)基因表达,研究SPHK1对胃癌细胞SGC-7901 、MGC-803细胞增殖的影响及其可能的作用机制.[方法]免疫组织化学法检测5对胃癌及癌旁组织的SPHK1蛋白表达量；构建质粒、制备逆转录病毒并感染胃癌细胞株SGC-7901、MGC-803,筛选并鉴定SPHK1-RNAi和对照载体(RNAi-Vector)稳定表达细胞株；MTT法检测胃癌细胞的增殖变化；Western blot法检测SPHK1、p21、p27、Akt、p-Akt、Rb、p-Rb蛋白的表达水平.[结果]SPHK1蛋白在胃癌组织中过表达；与对照组比较,两株SPHK1-RNAi稳定表达的胃癌细胞SGC-7901、MGC-803中SPHK1表达显著下调,抑制率分别为81.2％、65.1％；SPHK1-RNAi胃癌细胞增殖能力较对照组显著减弱；SPHK1-RNAi胃癌细胞的磷酸化Akt及磷酸化Rb蛋白表达明显降低,而p21、p27的蛋白表达水平明显上调.[结论]下调SPHK1基因表达能抑制胃癌细胞的增殖,其机制可能与细胞内Akt信号被减弱,细胞周期抑制蛋白p21、p27的表达上调有关.