RNA干扰沉默急性白血病细胞SUV39H1基因表达的实验研究

• 作者: 赵婷 马旭东 黄轶群
• 来源期刊: 中华血液学杂志
• 关键词: 白血病 RNA干扰 基因,SUV39H1 KG-1细胞 组蛋白修饰
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 49-54
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2013.01.012

摘要

目的 应用小干扰RNA(siRNA)干扰人急性髓系白血病细胞株KG-1细胞SUV39H1(suppressor of variegation 3-9 homolog 1)基因的表达,研究SUV39H1基因沉默对KG-1细胞增殖、抑癌基因p15表达及组蛋白甲基化、乙酰化修饰的影响,探寻白血病基因治疗的新靶点.方法 用LipofectamineTM2000将体外合成针对SUV39H1基因的siRNA片段转染到KG-1细胞后,采用RT-PCR方法检测siRNA对SUV39H1 mRNA表达的抑制效果,用四唑氮化合物(MTS)法绘制细胞增殖抑制曲线,Western blot法检测目的 基因SUV39H1和抑癌基因p15的表达及对组蛋白甲基化、乙酰化修饰的影响.结果 SUV39H1 siRNA转染KG-1细胞可沉默该基因;沉默SUV39H1基因表达可抑制细胞增殖,30、60、120、240 nmol/L SUV39H1 siRNA转染48 h后,KG-1细胞的增殖抑制率分别为(23.57±1.98)%、(48.69±1.84)%、(62.69±1.61)%、(81.06±3.22)%,差异有统计学意义(P<0.05);沉默SUV39H1基因可上调p15基因的表达,下调组蛋白H3K9三甲基化,上调组蛋白H3K9、H3的乙酰化.30、60、120 nmol/L SUV39H1 siRNA处理KG-1细胞48 h后,组蛋白H3K9三甲基化水平较对照组分别减少25%、33%、49%;组蛋白H3K9乙酰化水平增强,分别为对照组的1.83、2.16、3.07倍;组蛋白H3乙酰化水平逐渐升高为对照组的1.35、1.87、2.37倍;p15表达水平呈递增趋势,分别为对照组的1.52、2.89、3.08倍;而组蛋白H4、H3K14、H3K27的乙酰化水平未见显著变化.结论 沉默SUV39H1基因表达可能通过改变抑癌基因启动子区域的组蛋白修饰,即上调组蛋白H3K9乙酰化及下调H3K9甲基化,使p15基因重新表达,从而抑制细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄轶群	福建医科大学附属漳州市医院血液科	47	211	6.0	11.0
2	马旭东	福建医科大学附属漳州市医院血液科	54	210	7.0	11.0
3	赵婷	福建医科大学附属漳州市医院血液科	6	6	1.0	2.0