兔免疫球蛋白液相悬浮芯片的制备及制备条件的优化

• 作者: 吕建敏 吴蔚 朱亮 朱科燕 王德军 蔡月琴 陈民利 陈诚
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 兔免疫球蛋白 荧光微球 液相悬浮芯片 优化
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 981-985
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4452字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2013.09.020

摘要

目的:制备兔的免疫球蛋白液相悬浮芯片并对其制备条件进行优化,为进一步建立兔免疫球蛋白液相悬浮芯片检测技术提供基础.方法:分别将亲和纯化的兔IgG、IgM和IgA偶联至荧光编码微球,然后优化捕获抗体的偶联量、检测抗体、Streptavidin-PE抗体的最佳工作浓度以及微球-血清反应时间、检测抗体反应时间和Streptavidin-PE抗体反应时间等因素,建立兔IgG、IgM和IgA液相悬浮芯片.结果:1.25×106个荧光微球的最佳偶联抗体浓度分别为10 μg IgG、20 μg IgM和15 μg IgA;biotin 标记的IgG、IgM和IgA检测抗体最佳工作浓度分别为2、2 和5 μg/ml;IgG、IgM和IgA的最佳Streptavidin- PE抗体浓度均为2 μg/ml;微球-血清、血清-检测抗体及Streptavidin- PE抗体最佳反应时间分别为60、60和30分钟.结论:制备荧光编码微球兔免疫球蛋白悬浮芯片是可行的方法.