兔免疫球蛋白液相芯片的制备及其检测方法的建立

• 作者: 吴蔚 徐剑钦 徐孝平 王德军 蔡月琴 陈民利 黄宇
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 免疫球蛋白 液相芯片 xMAP 实验兔
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 433-438
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4644字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2013.06.004

摘要

目的 制备实验兔的免疫球蛋白液相芯片,建立液相芯片技术(xMAP)检测方法.方法 分别将兔IgG、IgM和IgA亲和纯化的捕获抗体耦联至荧光编码微球,对蛋白耦联量进行优化,制备兔IgG、IgM和IgA液相芯片,同步检测白毛黑眼兔(WHBE兔)和日本大耳白兔(JW兔)血清中IgG、IgM和IgA相对含量,建立可应用于实验兔免疫球蛋白半定量检测的xMAP方法,并对其结果用ELISA方法进行验证.结果 (1)IgG、IgM和IgA的最佳蛋白耦联量分别为10、20和15μg.(2)xMAP检测结果显示,WHBE兔血清中IgG、IgM蛋白含量显著低于JW兔(P＜0.05),IgA蛋白含量显著高于JW兔(P＜0.01); ELISA检测结果表明,WHBE兔血清中IgG、IgM蛋白含量显著低于JW兔(P＜0.05,P＜0.01),其中IgM蛋白含量变化达到极显著水平,IgA蛋白含量显著高于JW兔(P＜0.01).结论 应用制备的兔IgG,IgM和IgA液相芯片建立的xMAP方法,对实验兔血清进行检测,检测结果与ELISA结果一致,提示该方法可应用于实验兔血清的IgG、IgM和IgA半定量检测.