摘要:
目的 探讨血管内皮生长因子165基因(VEGF165)转染血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPC)并通过鼠尾静脉移植对脑损伤大鼠行为学以及脑创伤区神经-血管再生的影响.方法 选用4月龄雄性SD大鼠,由河南省实验动物中心提供,体重约200 g,分离培养大鼠外周血来源的血管内皮祖细胞,进行VEGF165转染.选取健康雄性大鼠90只按随机数字表法分为转染组、普通EPC组和正常对照组.各组动物均行中度颅脑损伤打击,术后转染组给予VEGF165转染的EPC鼠尾静脉移植,普通EPC组给予未转染的EPC移植,对照组注射等量细胞培养液,3组大鼠每日腹腔注射Brdu,分别于3、7、14 d每组随机抽取10只大鼠,处死前各组动物均按改良神经功能损伤严重程度评分(mNSS)评定神经功能,后断头取脑,做石蜡切片,行CD34+、Brdu免疫组化染色,在200倍光镜下观察创伤侧海马齿状回并计数阳性细胞,评估每组大鼠神经及血管再生情况.将所得各组实验数据采用单因素方差分析,LSD法检验,输入软件分析其数据差异是否有统计学意义.结果 在脑损伤后3、7、14 d各时间点测定的mNSS评分中,可得出转染组得分<普通EPC组得分<对照组得分,三组间差异有统计学意义(F=469.40、287.21、286.64,P均<0.05).各个时间点转染组大鼠脑片创伤侧海马齿状回CD34+、Brdu+细胞均显著高于普通EPC组及对照组,三组间有统计学差异(CD34+:F=321.88、82.62、284.02,P均<0.05;Brdu+:F=125.79、226.82、220.27,P均<0.05).结论 VEGF165转染血管EPC经鼠尾静脉移植能有效促进大鼠脑创伤侧神经血管再生,从而改善其预后.