恒河猴精原干细胞的筛选、培养与鉴定

• 作者: 刘慧莲 王庆忠 王汉海
• 来源期刊: 中国计划生育学杂志
• 关键词: 精原干细胞 筛选 培养 恒河猴
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 40-43
• 页数: 4页
• 字数: 3340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-8189.2013.01

摘要

目的:建立恒河猴精原干细胞的筛选和培养方法.方法:采用改良的二步酶消化法分离恒河猴睾丸细胞,用改进的差异贴壁筛选法纯化恒河猴精原干细胞,用添加了胶质细胞源神经营养因子(GDNF)、可溶性GFRα1和bFGF的DMEM/F12无血清培养基和小鼠胚胎成纤维细胞饲养层培养恒河猴精原干细胞,并通过形态观察、标志基因的免疫细胞化学分析和半定量RT-PCR分析鉴定培养细胞的干细胞活性.结果:分离纯化的恒河猴精原干细胞在添加了3种生长因子的培养基中能形成较大的干细胞克隆,并表达精原干细胞的标志基因.结论:本研究初步建立了恒河猴精原干细胞的培养体系,为进一步开展相关研究奠定基础.