摘要:
目的 观察脂多糖(LPS)对BV-2细胞形状变化及白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌情况的影响,探讨沉默信息调控因子1(SIRT1)在LPS诱导BV-2细胞释放前炎症因子过程中的作用. 方法 BV-2细胞分为调零组、对照组及LPS组,调零组不含细胞,只加培养基;对照组常规培养;LPS组分别加入不同浓度的LPS; MTT法检测各组存活率.另取BV-2细胞分为调零组、对照组、DOSO药物载体组及白藜芦醇组、Sirtinol组,调零组、对照组处理方法同前,DOSO药物载体组加入体积分数为0.3%的DMSO;白藜芦醇组加入10、25、50、100 μmol/L白藜芦醇;Sirtinol组加入1、2.5、5、10、25、50 μmol/L Sirtinl; MTT法检测各组细胞存活率.根据实验结果,选取适当浓度的LPS、白藜芦醇及Sirtinol,将BV-2细胞分为对照组、LPS组、白藜芦醇+LPS组、Sirtinol +LPS组,分别用ELISA方法检测各组细胞相应处理12、24 h后上清液中的IL-6和TNF-α的含量,Western blotting检测SIRT1在上述各组细胞加药处理24 h后的表达水平. 结果 与对照组相比,LPS组BV-2细胞数目增多,胞体肿胀,突起变短、增多.随着LPS浓度的增加,BV-2细胞存活率明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,LPS组BV-2细胞分泌的IL-6、TNF-α增多,S IRT1的表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05).与LPS组比较,经白藜芦醇处理后,细胞内SIRT1的表达量上升,而IL-6 、TNF-α的分泌水平下降,差异有统计学意义(P<0.05);相反,细胞经Sirtinol处理后,胞内SIRT1的表达量下降,IL-6、TNF-α的分泌水平上升,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 LPS可显著改变BV-2细胞形状并诱导细胞前炎症因子的表达,干预SIRT1的表达量对上述现象有明显的调节作用.