抑癌基因RB1在小鼠不同发育阶段卵母细胞中的表达及甲基化状态的研究

• 作者: 刘波澜 李蓉 林洪波 赵善飞 黄品秀
• 来源期刊: 生殖医学杂志
• 关键词: 胚胎植入 遗传学 卵母细胞 RB1 甲基化
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 124-128
• 页数: 5页
• 字数: 3487字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3845.2013.02.010

摘要

目的 研究抑癌基因RB1在小鼠不同阶段卵母细胞中的mRNA表达及DNA甲基化的状态,旨在探讨RB1基因在卵母细胞生长发育中的作用,为胚胎植入前肿瘤的诊断提供理论基础. 方法 采用改良的逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测RB1在不同发育阶段卵母细胞[GⅤ期(生殖泡期)、MⅠ期(第一次减数分裂中期)、MⅡ期(第二次减数分裂中期)]中的mRNA表达,即细胞裂解后直接逆转录+全转录扩增cDNA+荧光定量PCR扩增方法检测不同发育阶段卵母细胞的相对表达量.同时还进行DNA甲基化的研究:细胞裂解后直接进行亚硫酸盐处理,再进行半巢式PCR扩增出目的片段,把目的片段进行T载体(TA)克隆测序RB1在不同阶段卵母细胞中的甲基化状态. 结果 RB1在小鼠GⅤ期、MⅠ期、MⅡ期卵母细胞的表达量分别是:(0.054±0.004)、(0.080±-0.005)、(0.101±0.005),RB1在MⅡ期中的表达量约是GⅤ期的2倍,差别具有统计学意义(P＜0.05).RB1甲基化:MⅠ期和MⅡ期卵母细胞的24个CpG位点C完全变成T,所有CpG位点完全非甲基化.GⅤ期偶见1～2个CpG位点甲基化,所有CpG位点基本完全非甲基化. 结论 RB1 mRNA随着卵母细胞的生长发育表达量不断增加,RB1 DNA在卵母细胞(GⅤ～MⅡ)中尚未发生甲基化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李蓉	北京大学深圳医院生殖医学科	182	2118	22.0	41.0
2	刘波澜	北京大学深圳医院生殖医学科	11	29	4.0	5.0
3	林洪波	北京大学深圳医院生殖医学科	17	59	5.0	7.0
4	黄品秀	北京大学深圳医院生殖医学科	8	23	3.0	4.0
8	赵善飞	北京大学深圳医院生殖医学科	3	8	2.0	2.0