ChREBP基因siRNA表达质粒构建及对原代培养猪脂肪细胞生脂的影响

• 作者: 卢建雄 张国华 李昌辉 蔡勇 郭鹏辉 陈妍 霍生东
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: ChREBP siRNA 猪 脂肪细胞 脂肪生成
• 年，卷（期）: 2013,（24）
• 所属期刊栏目: 畜牧?兽医?资源昆虫
• 页码范围: 5196-5204
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.24.014

摘要

[目的]构建ChREBP基因siRNA表达质粒，干扰ChREBP在原代培养猪脂肪细胞的表达，研究其在葡萄糖诱导脂肪细胞生脂中的作用。[方法]合成4对靶向ChREBP基因的siRNA寡核苷酸，分别连接于pcDNA?6.2-GW/EmGFP载体构建siRNA表达质粒，测序验证后，采用脂质体介导法转染从3日龄仔猪皮下脂肪组织分离培养的脂肪细胞，荧光定量RT-PCR检测ChREBP基因沉默效率；以葡萄糖浓度为0-20 mmol·L-1的培养液培养转染细胞48 h，测定生脂及生脂基因表达变化。[结果]筛选出了1个转染效果好、ChREBP基因沉默效率达85%的siRNA表达质粒，转染原代培养猪脂肪细胞后，细胞生脂水平及生脂基因ACC1和FAS mRNA表达比阴性对照表达质粒转染细胞和未转染细胞显著降低（P＜0.05），且生脂水平不受葡萄糖水平的影响（P＞0.05）。[结论]构建的siRNA表达质粒能有效干扰猪脂肪细胞ChREBP表达，葡萄糖通过转录因子ChREBP调控猪脂肪细胞生脂及生脂基因表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡勇	西北民族大学生命科学与工程学院	46	229	9.0	13.0
2	卢建雄	西北民族大学生命科学与工程学院	62	330	11.0	15.0
3	郭鹏辉	西北民族大学生命科学与工程学院	25	77	5.0	7.0
4	霍生东	西北民族大学生命科学与工程学院	30	108	6.0	8.0
5	陈妍	西北民族大学生命科学与工程学院	13	33	4.0	5.0
6	张国华	西北民族大学生命科学与工程学院	16	35	3.0	5.0
7	李昌辉	西北民族大学生命科学与工程学院	4	14	3.0	3.0