玫瑰孢链霉菌SWU2010遗传转化体系的建立和优化

• 作者: 廖国建 柳青 王磊 胡昌华 马廷梅
• 来源期刊: 西南大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 玫瑰孢链霉菌 接合转移 pKC1139 pSET152 cre/loxP
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 药学
• 页码范围: 153-158
• 分类号: Q933
• 语种: 中文

摘要

玫瑰孢链霉菌(Streptom yces roseosporus)是近几年备受关注的抗生素—达托霉素(Daptomycin)的产生菌,具有重要的研究价值和应用前景.目的:为了对Streptom yces roseosporus中的功能基因进行研究,构建达托霉素高产菌株,需要建立一种稳定、高效的遗传转化体系.方法:以pSET152和pKC1139为载体,探索优化了S.roseosporus SWU2010与大肠杆菌进行接合转移的条件,以此为基础将体外构建的ploxP质粒和带有cre重组酶基因的质粒pALcre先后转入S.roseosporus SWU2010中.结果:AS-1培养基是接合转移的最佳培养基;孢子的预萌发条件为50℃热激10 min,转化效率达10-6～10-5.另外,抗生素覆盖时间16～18 h效果最好.利用已建立的接合转移体系,成功将两侧带有loxP位点的安普霉素抗性基因成功敲除.实验结果为进一步研究达托霉素的生物合成基因和对达托霉素进行组合生物合成改造奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡昌华	西南大学药学院现代生物医药研究所	58	255	9.0	13.0
2	廖国建	西南大学药学院现代生物医药研究所	27	101	6.0	9.0
3	王磊	西南大学药学院现代生物医药研究所	51	251	9.0	13.0
4	马廷梅	西南大学药学院现代生物医药研究所	1	1	1.0	1.0
5	柳青	西南大学药学院现代生物医药研究所	1	1	1.0	1.0