仙台病毒抗原的制备及初步应用

• 作者: 佟巍 刘先菊 向志光 张丽芳 李雨函 王艳蓉 魏强
• 来源期刊: 实验动物科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 仙台病毒抗原 酶联免疫吸附试验 免疫印迹试验 间接免疫荧光试验
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: Q939
• 字数: 3396字
• 语种: 中文

摘要

目的 纯化和制备仙台病毒(Sendai Virus,SeV)抗原,初步应用于间接酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫印迹(Western-blot)试验对SeV抗体进行检测.方法 通过鸡胚尿囊腔及BHK-21细胞增殖法培养增殖SeV,低温冻融去除细胞碎片后,用差速离心及超声破碎法纯化并制备SeV抗原,以SDS-PAGE电泳进行纯度鉴定；优化确定间接SeV-ELISA抗原的最佳包被浓度,对比检测间接免疫荧光试验(IFA)初筛小鼠SeV阳性血清,同时用Western-blot检测法进行特异性验证.结果 用BHK-21细胞培养增殖的SeV,病毒滴度HA为1∶128,SeV抗原的电泳纯度达80％；确定SeV-ELISA抗原最佳包被浓度为2.5 μg/mL时,测得小鼠SeV抗体ELISA与IFA的阳性符合率为100％,并由Western-blot检测法得到了证实.结论 通过BHK-21细胞增殖和差速离心及超声破碎法制备的SeV抗原,可用于ELISA及Western-blot法对小鼠SeV抗体的检测,进而验证了SeV具有较强的抗原特异性及蛋白活性.