仙台病毒F基因的克隆及原核表达

• 作者: 王宗耀 王胜昌 胡建华 高诚
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 仙台病毒 F基因 克隆 诱导表达
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 430-435
• 页数: 6页
• 分类号: R373-33
• 字数: 5077字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2007.06.008

摘要

目的 利用原核表达系统表达仙台病毒(Sendai Virus)F蛋白主要抗原片段FP(S),并对表达产物进行免疫学初步研究.方法 根据GenBank公布的仙台病毒F蛋白(gi:9627219)的基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR扩增出F基因的主要抗原片段FP(S),插入pMD-18-T载体中,鉴定正确后克隆入pQE31原核表达载体中,将鉴定正确的pQE31-FP(S)转化大肠埃希菌M15,IPTG诱导表达,对大肠埃希菌裂解物进行SDS-PAGE和Western-blot验证.结果 大肠埃希菌表达的FP(S)相对分子质量约26×103,与预期相符;能与SeV阳性血清发生特异性反应,出现单一条带.结论 原核表达的FP(S)蛋白有良好的抗原性,为检测仙台病毒抗体的ELISA检测方法的研究奠定了基础.