临床皮炎外瓶霉荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 王芳 田曙光 穆超 胡小华 赵静雅 韩黎 高莉
• 来源期刊: 中国真菌学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 皮炎外瓶霉 核糖体基因 荧光定量聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 321-324
• 页数: 4页
• 分类号: R379.9
• 字数: 3323字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立基于TaqMan探针技术的皮炎外瓶霉荧光定量PCR检测方法.方法 通过对皮炎外瓶霉ITS区域基因组序列(GenBank:JN675373.1)进行分析,设计合成特异性引物和荧光标记探针,优化荧光定量PCR反应条件.以临床标本中分离的皮炎外瓶霉为阳性菌株,及其他种类真菌和细菌作为阴性对照菌株,从特异性、敏感性及重复性方面对该方法检测效果进行评价.结果 该研究设计的引物和探针能扩增皮炎外瓶霉特异性序列.临床分离得到的皮炎外瓶霉在反应中有明显扩增曲线,而甄氏外瓶霉、棘状外瓶霉、烟曲霉、白色念珠菌、新生隐球菌、马内菲青霉等20株菌在CT值≤38范围内均未有扩增;利用基因重组构建的标准品完成了标准曲线的绘制,在1.0×103～1.0×107拷贝数(Cp)内具有良好的线性关系(R2=1.000),最低可检出量为10 Cp/μL.结论 成功建立了荧光定量PCR检测皮炎外瓶霉方法,该法特异度强、敏感度高、重复性好,将有助于临床皮炎外瓶霉感染的早期诊断和针对性治疗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高莉	河北师范大学生命科学学学院	23	140	7.0	11.0
2	田曙光	军事医学科学院疾病预防控制所医院感染监控中心	19	54	4.0	6.0
3	韩黎	军事医学科学院疾病预防控制所医院感染监控中心	16	51	4.0	6.0
4	胡小华	军事医学科学院疾病预防控制所医院感染监控中心	5	10	2.0	2.0
5	王芳	河北师范大学生命科学学学院	5	17	2.0	4.0
6	穆超	河北师范大学生命科学学学院	1	1	1.0	1.0
7	赵静雅	军事医学科学院疾病预防控制所医院感染监控中心	2	1	1.0	1.0