痰中结核分枝杆菌DNA提取方法的比较及在LAMP检测中的应用

• 作者: 张兵 文岚 欧新华 王孝君 田斌 郭彦昌
• 来源期刊: 湖南师范大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分支杆菌 DNA提取 痰
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 页码范围: 61-65
• 页数: 5页
• 分类号: R183.3
• 字数: 3060字
• 语种: 中文

摘要

目的：对5种DNA提取方法进行比对，为选择适用于痰中结核分枝杆菌DNA的提取方法提供依据。方法：采用PureLink genomic DNA kits (PLKm)、苯酚与氯仿法(PCm)、Chelex-100法(Cm)、磷酸盐缓冲液法(PBm)及硅珠法(SBm)5种方法提取痰标本中的DNA，对提取产物的浓度、纯度等技术指标进行分析，并对核酸扩增结果进行统计。结果：DNA浓度均值由高到低依次是PBm、Cm、PCm、SBm、PLKm，组间比较差异有统计学意义，两两比较发现PLKm与PCm、Cm、PBm之间差异有统计学意义，但Cm与SBm间的比较有统计学意义；5种提取方法的OD260：OD280比值均值与1.8的接近程度依次是PLKm、PCm、Cm、PBm、SBm，组间比较差异有统计学意义，两两比较发现除SBm与另外4种方法间存的差异具有统计学意义外，其余各组间的比较均无统计学意义；采用PLKm、PCm及Cm提取的产物均扩增出阳性结果，而PBm、SBm提取产物分别有18例和11例未获得阳性结果，经Mc-Nemar x2检验方法间的差异有统计学意义。结论：Chelex-100提取痰标本中结核分枝杆菌DNA是一种简便、省时、廉价适用于基层结核病实验室进行核酸检测的方法。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	欧新华		42	155	7.0	8.0
2	王孝君		10	65	4.0	8.0
3	田斌		21	57	4.0	6.0
4	张兵		15	38	4.0	5.0
5	文岚		17	86	4.0	8.0
6	郭彦昌		5	15	2.0	3.0