跨膜型肿瘤坏死因子α稳定表达细胞株的构建

• 作者: 程远国 童欣 钱爱东
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 跨膜型肿瘤坏死因子α 基因缺失 Sp2/0细胞株 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 662-665
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2258字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2013.05.015

摘要

目的：：在体内，相对分子质量为26×103的跨膜型肿瘤坏死因子α（mTNF-α）可被TNF转化酶（TACE）酶解成相对分子质量为17×103的游离型TNF-α（sTNF-α）。为评价新研发的TNF-α全人源单克隆抗体与mTNF-α的结合能力，以及该单抗的ADCC作用，须构建只能稳定表达mTNF-α而不受TACE影响的Sp2/0细胞株。方法：PCR扩增缺失了TACE酶切位点的人TNF-α野生型基因序列，构建pcDNA3.1（+）-dTNF-α重组质粒并测序鉴定；重组质粒转染Sp2/0细胞，构建只能稳定表达mTNF-α的细胞株，用流式细胞仪检测其表达情况。结果：pcDNA3.1（+）-dTNF-α重组质粒测序结果与设计缺失基因的碱基序列完全一致，重组质粒构建成功；转染的阳性细胞株经流式细胞仪检测有表达，其中Clone11、15、16的表达量最高。结论：跨膜型TNF-α稳定表达细胞株构建成功，可用于TNF-α全人源单克隆抗体体外药效的评价。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱爱东		283	1216	15.0	21.0
2	程远国	军事医学科学院微生物流行病研究所	38	140	7.0	10.0
3	童欣		1	0	0.0	0.0