幽门螺杆菌过氧化氢酶的重组表达、纯化及免疫特性研究

• 作者: 屈玲 苏明权 郑善銮 郝晓柯 马越云 黄萍
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 过氧化氢酶 重组表达 免疫学特性
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: R378.2|Q784
• 字数: 4170字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2013.01.003

摘要

目的 对幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)的过氧化氢酶(catalase,KatA)进行重组表达和纯化,并进行免疫学特性研究.方法 采用PCR扩增幽门螺杆菌katA全长基因,构建重组表达载体pET-28a-katA,在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,通过包涵体洗涤和亲和层析纯化出重组蛋白,并采用Western blot和ELISA等方法对其进行免疫学特性研究.结果 克隆出幽门螺杆菌1 518 bp的全长katA基因,在大肠埃希菌中诱导表达出505个氨基酸组成、分子量约为58 000的重组KatA蛋白,其表达量约占细菌总蛋白的20%,且以包涵体形式表达.经亲和层析的重组蛋白纯度约为85%,并可与兔抗Hp抗血清发生特异性反应.通过重组蛋白的动物免疫可产生高效价抗血清,并特异性识别多种Hp菌株.结论 成功重组表达与纯化出幽门螺杆菌KatA蛋白,并具备良好的免疫学特性,为Hp致病机制、血清学诊断以及亚单位疫苗研究奠定重要的实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝晓柯	第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心	322	1751	18.0	23.0
2	郑善銮	第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心	89	482	11.0	16.0
3	马越云	第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心	112	451	11.0	15.0
4	苏明权	第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心	226	1052	14.0	20.0
5	黄萍	第四军医大学口腔医院检验科	33	130	7.0	9.0
6	屈玲	第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心	12	54	4.0	6.0