肿瘤特异性TCRαβ基因转染诱导记忆性T细胞分化及其免疫功能的研究

• 作者: 何免 吴凤麟 张文峰 杨暖 薄华本 邵红伟 黄树林
• 来源期刊: 中国医药生物技术
• 关键词: 受体,抗原,T细胞,α-β 转染 细胞毒性,免疫
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 321-330
• 页数: 10页
• 字数: 6104字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2013.05.001

摘要

目的研究特异性 TCR 基因转染 T 细胞被肿瘤抗原激活后，记忆性 T 细胞的分化情况，并明确其表型特征和免疫功能。 <br>　　方法密度梯度离心法分离 PBMC，重组 TCR 腺病毒感染 T 细胞，流式细胞术检测外源 TCR 表达效率。AFP 表位肽刺激 T 细胞，流式细胞术检测 TCR 基因转染 T 细胞经抗原刺激后，记忆性 T 细胞标志分子表达。MTT 法检测 T 细胞对不同肿瘤细胞株的杀伤活性。Annexin V-PI双染法检测靶细胞凋亡比例。ELISA 法检测 T 细胞作用于靶细胞后 IFN-γ与 IL-2分泌水平。 <br>　　结果重组腺病毒载体感染3 d 后，外源 TCR 表达比例接近30%。特异性 TCR 基因转染可有效促进 T 细胞识别肿瘤抗原后活化， CD45RO+细胞比例逐渐上升至接近50%。CD45RO+细胞以 CD62L-CD44+表型为主。此后CD62L+细胞比例逐渐上升。最终出现分群明显的CD62L+CD44+TCM 表型细胞。特异性 TCR 基因转染能够促进 T 细胞杀伤 AFP+靶细胞，诱导靶细胞凋亡，并促进IFN-γ分泌。抗原预先刺激能够进一步增强 TCR 基因转染T 细胞抗肿瘤免疫效应。 <br>　　结论 TCR 基因转染能够有效促进 T 细胞识别肿瘤抗原后活化。经肿瘤抗原预先刺激的 TCR 基因转染 T 细胞将启动记忆性 T 细胞分化，在再次遭遇表达相同抗原的肿瘤细胞时发挥更为强烈的免疫效应。