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下调Nrf2及TrxR表达对慢性髓性白血病细胞增殖的影响及机制探讨
下调Nrf2及TrxR表达对慢性髓性白血病细胞增殖的影响及机制探讨
作者:
任方刚
刘艳
朱孟霞
潘飞
王宏伟
覃艳红
许莲蓉
陈秀花
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
K562细胞
NF-E2相关因子2
硫氧还蛋白还原酶
RNA干扰
细胞凋亡
摘要:
目的 研究核因子NF-E2相关因子2(Nrf2)及硫氧还蛋白还原酶(TrxR)基因表达对慢性髓性白血病(CML)细胞增殖的影响并初步探讨其作用机制.方法 根据siRNA序列设计原则,设计并合成四条针对Nrf2的小分子干扰RNA (siRNA)及一条阴性对照siRNA,并构建慢病毒载体,转染CML细胞系K562细胞,以未转染的细胞作为空白对照;应用激光共聚焦显微镜观察转染效果,流式细胞术检测转染效率;实时荧光定量PCR检测siRNA的抑制效应;CCK-8法检测细胞增殖抑制率;膜联蛋白A5(Annexin V-PE)/碘化丙锭(PI)双染法流式细胞术检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡状态.结果 慢病毒转染效率达65%,实时荧光定量PCR检测显示明显抑制Nrf2表达的细胞克隆为K562-C3,其Nrf2相对表达水平(1.003±0.093)高于对照组(0.344±0.032);TrxR相对表达水平(1.090±0.549)高于对照组(0.395±0.029),差异均有统计学意义(P值均<0.001);CCK-8法检测显示转染Nrf2特异siRNA 24、48、72 h细胞的K562-C3细胞增殖抑制率分别为(4.74±0.39)%、(6.13±1.78)%和(25.36±3.77)%;转染72 h的K562-C3细胞凋亡率(29.9%)与对照组(7.9%)比较明显提高;激光共聚焦显微镜显示Annexin V-PE标记阳性细胞出现核固缩、核碎裂及凋亡小体形成等凋亡特征.结论 在细胞水平上,Nrf2特异的siRNA转染K562细胞可抑制Nrf2表达并引起下游调控的抗氧化酶如TrxR表达下调,抑制K562细胞增殖,促进细胞凋亡.
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篇名
下调Nrf2及TrxR表达对慢性髓性白血病细胞增殖的影响及机制探讨
来源期刊
中华血液学杂志
学科
关键词
K562细胞
NF-E2相关因子2
硫氧还蛋白还原酶
RNA干扰
细胞凋亡
年,卷(期)
2013,(6)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
527-531
页数
5页
分类号
字数
3604字
语种
中文
DOI
10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2013.06.015
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
王宏伟
山西医科大学第二医院血液科
81
238
7.0
11.0
2
覃艳红
山西医科大学第二医院血液科
32
68
5.0
5.0
3
陈秀花
山西医科大学第二医院血液科
23
41
4.0
4.0
4
许莲蓉
山西医科大学第二医院血液科
39
79
5.0
7.0
5
任方刚
山西医科大学第二医院血液科
21
81
5.0
7.0
6
刘艳
山西医科大学第二医院血液科
13
62
4.0
7.0
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潘飞
山西医科大学第二医院血液科
3
6
2.0
2.0
8
朱孟霞
山西医科大学第二医院血液科
4
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2.0
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传播情况
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NF-E2相关因子2
硫氧还蛋白还原酶
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细胞凋亡
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
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相关学者/机构
期刊影响力
中华血液学杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
0253-2727
CN:
12-1090/R
开本:
16开
出版地:
天津市和平区南京路288号
邮发代号:
6-54
创刊时间:
1980
语种:
chi
出版文献量(篇)
6600
总下载数(次)
7
总被引数(次)
45362
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