BIGH3R555W突变转基因小鼠模型的建立

• 作者: 崔红平 廖昕 王方
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: BIGH3基因 显微注射 转基因小鼠
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 11-15
• 分类号: R772.23
• 字数: 3270字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn1008-0392.2013.05.003

摘要

目的 建立BIGH3R555W突变转基因角膜营养不良小鼠模型.方法 构建以磷酸甘油酸激酶(phosphoglycerate kinase,PGK)为启动子的BIGH3 (M)-IRES-EGFP重组质粒载体,通过原核显微注射方法将线性化、纯化后的外源质粒注射入C57小鼠受精卵中,胚胎移植入假孕受体母鼠输卵管内,获得子代小鼠.用PCR方法检测子代鼠尾基因组DNA,通过RT-PCR及Western印迹法检测BIGH3R555w基因表达.结果 8只假孕小鼠共移植注射后的胚胎84枚,出生35只子代鼠,经PCR检测得到4只转基因阳性小鼠.RT-PCR和Western印迹法检测结果显示,BIGH3R555W在转基因小鼠角膜表达量明显增多.结论 通过显微注射法使外源基因BIGH3R555W突变体在小鼠基因组中整合,成功建立了BIGH3R555W突变转基因小鼠模型,该模型可为今后进一步研究角膜营养不良疾病的发病机制提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔红平	同济大学附属东方医院眼科	51	217	8.0	12.0
2	王方	同济大学附属第十人民医院眼科	46	281	10.0	14.0
3	廖昕	同济大学附属第十人民医院眼科	4	13	2.0	3.0