小麦淀粉分支酶基因SBE-Ⅱb植物表达载体的构建及表达鉴定

• 作者: 曹连莆 李卫华 王自布 石培春 齐军仓
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦 转基因 实时荧光定量(qRT-PCR) 淀粉分支酶基因(SBE-Ⅱb)
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 生物技术与工程
• 页码范围: 620-625
• 页数: 6页
• 分类号: S512.032
• 字数: 4791字
• 语种: 中文

摘要

从花后15 d的小麦(Triticum aestivum L.)胚乳中提取RNA,根据GeneBank上已经公布的小麦淀粉分支酶基因(SBE-Ⅱb)序列(AY740401.1)设计引物,经RT-PCR扩增得到一条2 511 bp的条带,测序结果与公布的序列一致.将克隆得到的基因构建到了植物表达载体pPZP35S上,通过农杆菌叶盘转化法转化烟草叶片,经卡那霉素筛选、PCR扩增鉴定证明,SBE-Ⅱb基因已成功转入烟草细胞中,获得4个转基因株系.转基因烟草叶片与野生型比较,颜色变暗,植株较小.RT-PCR半定量和实时荧光定量RT-PCR分析表明,转基因烟草株系的叶片中有SBE-Ⅱb基因的表达,与对照植株相比,转SBE-Ⅱb基因的植株中的转录本达到了显著性的变化,但是其淀粉分支酶活性没有达到显著性变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹连莆	石河子大学农学院	78	733	13.0	22.0
2	李卫华	石河子大学农学院	44	201	8.0	13.0
3	齐军仓	石河子大学农学院	61	535	12.0	20.0
4	石培春	石河子大学农学院	19	179	7.0	13.0
5	王自布		3	2	1.0	1.0