针对B7-H1的siRNA对脑胶质瘤U87细胞增殖和凋亡的影响

• 作者: 史圣甲 张剑宁 杨安钢 杨帆 温伟红 王曦 皇甫罗锴 郭张燕
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 关键词: B7-H1 RNAi U87细胞 脑胶质瘤
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 183-188
• 语种: 中文

摘要

目的:利用针对B7-H1的siRNA在脑胶质瘤U87细胞中下调B7-H1的表达,研究B7-H1的表达下调对U87细胞增殖和凋亡的影响.方法:根据人B7-H1的mRNA序列设计并合成两对针对B7-H1的siRNA,于转染前一天将U87细胞接种于10 cm细胞培养皿中,以转染时细胞融合度为50％-80％为宜,分别用250 μ10PTI-MEM稀释15μl siRNA与15μl转染试剂Lipofectamine 2000,将两者混匀室温静置20 rin后,滴入细胞培养皿中.转染60或72 h后利用流式细胞术检测B7-H1在细胞表面的表达情况,利用荧光定量PCR和Western Blot分别检测B7-H1的mRNA和蛋白质水平,并用MTT和流式细胞术检测B7-H1表达下调后,U87细胞增殖和凋亡的改变.结果:与阴性对照组相比,两对针对B7-H1的siRNA均可有效下调U87细胞中B7-H1的表达,流式细胞术结果显示与阴性对照组相比,B7-H1阳性表达率由53.2％分别下调至26.7％和20.6％；MTT结果显示B7-H1表达下调后U87细胞的增殖被显著抑制,培养第5天吸光度值由0.58±0.02分别下降至0.451 ±0.02及0.342±0.016；流式细胞术结果显示B7-H1表达下调后U87细胞凋亡明显,早期凋亡率由0.1％分别增加至12.8％及13.2％.结论:B7-H1的表达下调可有效抑制脑胶质瘤U87细胞的增殖,并促进细胞凋亡,提示B7-H1可能作为脑胶质瘤基因治疗的一个潜在靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨帆	第四军医大学西京医院神经外科	57	306	9.0	14.0
2	杨安钢	第四军医大学西京医院基础部免疫教研室	147	801	14.0	21.0
3	王曦	第四军医大学西京医院神经外科	34	146	7.0	10.0
4	温伟红	第四军医大学西京医院基础部免疫教研室	44	213	7.0	12.0
5	郭张燕	第四军医大学西京医院基础部免疫教研室	10	33	4.0	5.0
6	史圣甲	第四军医大学西京医院基础部免疫教研室	5	14	2.0	3.0
7	皇甫罗锴	第四军医大学西京医院神经外科	2	9	2.0	2.0