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摘要:
目的 探讨微RNA-34a(miRNA-34a)对细胞通过调控沉默交配型信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)的表达,从而引起细胞衰老的作用.方法 构建pre-miRNA-34a表达载体,并将其和一个不针对任何基因的微小RNA-1792(miRNA-1792)表达载体(其他实验室赠送)分别转染至HEK293和HUVEC细胞内,用RT-PCR、Western blot检测各细胞组SIRT1 mRNA与蛋白表达水平,以未转染的细胞为对照;将HUVEC细胞分为转染不同质粒、未转染质粒和用SIRT1激活剂白藜芦醇(终浓度1μmol/L,作用2h)处理HUVEC细胞(HUVEC-Res)组,中性彗星电泳分析H2O2作用2h后4组HUVEC细胞的双链损伤情况;用阿霉素处理上述4组HUVEC细胞2h,β-半乳糖甘酶(SA-β-gal)染色检测各细胞不同时间点的衰老情况.结果 测序结果表明pre-miRNA-34a表达载体构建成功;RT-PCR、Western blot显示HEK293-pre-miRNA-34a和HUVEC-pre-miRNA-34a中SIRT1mRNA和蛋白质表达的水平明显下降(P<0.001);中性彗星电泳检测发现经H2O2处理后,HUVEC-Res组DNA损伤最轻,而HUVEC-miRNA-34a组DNA损伤程度最为严重;SA-β-gal染色显示DNA损伤后HUVEC-miRNA34a衰老程度较其它3组严重,而HUVEC-Res组的衰老程度最为轻微.结论 miRNA-34a通过抑制SIRT1表达调控细胞衰老.
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文献信息
篇名 MicroRNA-34a调控细胞衰老的研究
来源期刊 四川大学学报(医学版) 学科
关键词 miRNA-34a SIRT1 细胞衰老 DNA损伤
年,卷(期) 2013,(1) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 1-5
页数 分类号
字数 语种 中文
DOI
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作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 刘戟 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室 33 146 7.0 9.0
2 杜文婷 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室 8 29 3.0 5.0
3 范雪娇 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室 11 60 5.0 7.0
4 杨鸣鸣 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室 5 18 3.0 4.0
5 任鹏亮 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室 1 3 1.0 1.0
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miRNA-34a
SIRT1
细胞衰老
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双月刊
1672-173X
51-1644/R
大16开
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62-72
1959
chi
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