嗜水气单胞菌双重PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 夏飞 徐跑 梁利国 王璐 谢骏
• 来源期刊: 水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 嗜水气单胞菌 双重PCR 快速检测 气溶素基因 细胞兴奋性肠毒素基因
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 219-223
• 页数: 5页
• 分类号: S917.1
• 字数: 3740字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank收录的细胞兴奋性肠毒素(alt)基因和气溶素结构基因(aerA),依据嗜水气单胞菌保守序列分别设计能检测alt和aerA基因的特异性引物,并进行PCR反应体系和反应条件的优化.建立了一种快速检测嗜水气单胞菌双重PCR方法.结果显示,在同一PCR反应体系中,供试菌株嗜水气单胞菌扩增2条目的带,扩增产物的片段大小分别为200 bp和280 bp,而对照菌株温和气单胞菌、杀鲑气单胞菌、豚鼠气单胞菌、河流弧菌的PCR扩增则无条带检出.敏感性试验结果显示,该双重PCR最低能检测3×104 cfu/mL菌体密度的嗜水气单胞菌,对嗜水气单胞菌模板DNA的检出极限为49 fg/μL;同时对送检的患病水产品进行抽检,检测出阳性结果的样品均可分离到优势生长的嗜水气单胞菌.结果证实,试验所建立的基于2种基因的双重PCR方法快捷、灵敏,为今后由于该菌所引起的水产动物疾病的检测提供了参考依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢骏	中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业与种质资源利用重点实验室	187	2128	25.0	33.0
2	徐跑	中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业与种质资源利用重点实验室	78	828	17.0	25.0
3	王璐	中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业与种质资源利用重点实验室	18	122	5.0	11.0
5	梁利国	中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业与种质资源利用重点实验室	15	210	8.0	14.0