西农萨能奶山羊INSIG-1编码区的克隆、序列特征分析和组织表达

• 作者: 孙雨婷 席利萌 张犁苹 李芳 王慧 罗军 胡仕良
• 来源期刊: 西北农林科技大学学报（自然科学版）
• 关键词: 西农萨能奶山羊 胰岛素诱导基因1 实时荧光定量PCR 序列分析 组织表达
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 24-30
• 页数: 7页
• 字数: 4942字
• 语种: 中文

摘要

[目的]克隆西农萨能奶山羊胰岛素诱导基因1(INSIG-1)编码区,并对其进行序列特征分析和组织表达规律研究.[方法]提取西农萨能奶山羊总RNA,反转录cDNA后进行PCR反应,对克隆得到的INSIG-1序列进行生物信息学分析.用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测INSIG-1在皮下脂肪、胸部肌肉、乳腺、肝脏、肾脏、心脏、肺、脾脏、瘤胃、小肠10个组织中的表达情况.[结果]获得西农萨能奶山羊INSIG-1基因1 014 bp序列(GenBank登录号JQ665439),其中编码区序列长度为831 bp,编码276个氨基酸.西农萨能奶山羊INSIG-1编码区与牛(GenBank登录号NM_001077909)的亲缘关系最近,相似性达97％,编码氨基酸序列的相似性达90％,而与小鼠(GenBank登录号NM_025836)的亲缘关系较远.预测INSIG-1蛋白质分子量为29.70 ku,理论等电点为8.99;INSIG-1蛋白质具有5个跨膜螺旋结构,且有较强的疏水性,不含信号肽.RT-qPCR检测结果表明,在西农萨能奶山羊10个组织中INSIG-1均有表达,其中在肝脏中的相对表达量最高,皮下脂肪、胸部肌肉、肺次之,在心脏中的相对表达量最低.[结论]克隆得到了西农萨能奶山羊的INSIG-1基因,并探明了其组织表达规律.