西农萨能奶山羊脂联素受体1基因(AdipoR1)cDNA克隆、表达及功能分析

• 作者: 余康 张天颖 罗军 赵旺生
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 西农萨能奶山羊 脂联素受体基因(AdipoR1) 基因克隆 组织表达
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 80-88
• 页数: 9页
• 字数: 6492字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.01.009

摘要

脂联素(adiponectin)具有改善胰岛素敏感性,调节脂肪酸代谢和参与细胞增殖和分化的功能.本研究参考GenBank中已收录的牛Bos taurus)、小鼠(Mus musculus)和人(Homo sapiens)等物种脂联素受体1基因(adiponectin receptor 1,AdipoR1)序列的同源比对结果,设计和合成PCR扩增引物,采用反转录PCR和RACE技术,分离并克隆了西农萨能奶山羊(Capra hircus)AdipoR1的cDNA序列.结果显示,AdipoR1全长2 032 bp (GenBank登录号:HQ846828),包括开放阅读框(open reading frame,ORF)1 128 bp,3'非翻译区(untranslated regions,UTR) 719 bp和5'UTR 185 bp,该基因编码375个氨基酸.通过氨基酸序列比对发现,山羊与牛、猪(Sus scrofa)、小鼠和人的AdipoR1相似性较高,均在95％以上.蛋白质结构分析表明,其蛋白质的分子量为42.44 kD,等电点为7.19,含7个跨膜结构域,并且整个序列中不含信号肽.组织表达分析显示,该基因在肺中的表达量最高,小肠次之,在心脏中表达量最低,而其余8个组织中AdipoR1 mRNA水平变化则比较平缓;奶山羊乳腺组织中AdipoR1表达量分析表明,AdipoR1的表达量在干奶期和泌乳盛期乳腺组织差异显著(P＜0.05).用不同浓度胰岛素(insulin)和催乳素(prolactin)处理奶山羊乳腺上皮细胞,结果发现,用胰岛素处理乳腺上皮细胞后,AdipoR1的表达量下调,在胰岛素浓度为50 nmo/L时效果最明显(P＜0.01);用催乳素处理乳腺上皮细胞后,AdipoR1的表达量上升,在浓度为100 mg/mL时作用最明显(P＜0.05),表明该基因在奶山羊乳腺上皮细胞中具有一定的调控作用.本研究为进一步揭示AdipoR1基因在奶山羊乳腺组织中的功能提供基础资料.