piggyBac 转座子在牛基因组的整合位点及特征分析

• 作者: 张路培 李俊雅 杜新华 许尚忠 高会江 高雪
• 来源期刊: 遗传
• 关键词: piggyBac 转基因 牛基因组 整合位点
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 771-777
• 页数: 7页
• 字数: 4712字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1005.2013.00771

摘要

piggyBac(PB)转座子作为一种遗传工具被广泛应用于多个物种的转基因及插入突变研究,目前PB 转座子在牛中的相关研究还较少.为了获得PB 转座子在牛基因组中的整合位点,总结其转座特征,文章构建了PB[CMV-EGFP]和pcDNA-PBase 二元转座系统,利用细胞核电转技术共转染牛耳组织成纤维细胞,经G-418 筛选,获得了稳定转染EGFP 的转基因细胞系; 提取细胞基因组DNA,利用基因组步移技术扩增PB 转座子5′ Bac区插入位置的DNA 序列; 通过与牛基因组序列进行BLAST 比对,得到PB 转座子在牛基因组中的插入位点.文章共获得了8 个有效的整合位点,但仅有5 个位点定位到染色体1、2、11 和X 染色体上.序列分析表明:在牛基因组中,PB 转座子可特异性的插入到"TTAA"位置,并整合到基因间的非调控区; 分析整合位点"TTAA"相邻一侧的5 个碱基组成,发现PB 转座子5′端倾向于插入到GC(62.5%)碱基富集区.该研究表明,PB转座子可以在牛基因组中发生转座,获得的整合位点信息为利用PB 转座子在牛上开展遗传学研究提供了理论参考.