应用蛋白芯片检测CIK细胞与其培养上清蛋白谱的改变

• 作者: 严新民 华映坤 唐慧 左荣霞 李丽 王林坪 王金丽 董虹 高建梅
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞因子诱导的杀伤细胞 培养上清液 细胞裂解液 蛋白芯片
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 1156-1162
• 分类号: R73-36+2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2013.12.011

摘要

目的 应用蛋白芯片技术检测不同患者来源的细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)细胞裂解液和培养上清的蛋白谱改变.方法 将3例不同患者来源的人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)在体外经细胞因子诱导成CIK细胞,经流式细胞术测定细胞表型后,分别收集培养第20天的CIK细胞和细胞培养上清,应用AAH-BLM-1蛋白芯片分别获得CIK细胞裂解液和细胞培养上清中507个蛋白的改变.结果 CIK细胞在培养第20天,CD3+和CD3+CD56+的T细胞分别为(86.43±10.65)％和(38.58±3.94)％.CIK细胞培养上清液中共有6个蛋白明显升高(Signal≥700,FC≥1.8):MIP-1β (FC=21.28)、GzmA (FC=5.54)、IFN-γ(FC=2.78)、MCP-l(FC=2.22)、TMPO (FC=2.05)、IL-13 (FC=1.81);细胞裂解液共有8个蛋白明显升高(Signal≥700):GzmA (Signal=1 968.77)、ET (Signal=l,398.60)、IL-13 (Signal=1 333.47)、TFPI (Signal=959.76)、NRG3(Signa1=944.09)、IL-7(Signal=867.12)、MIP-lα(Signal=833.43)、MIP-1p(Signal=704.88).将上述两组结果对比分析后发现GzmA、IL-13和MIP-1β这3个蛋白在两组中均明显升高.结论 CIK细胞在活化过程中合成并分泌如GzmA、IFN-γ、IL-8和IL-13等多种蛋白产物,这些蛋白产物通过直/间接杀伤肿瘤细胞并促进T细胞增殖活化在抗肿瘤治疗中发挥重要作用.