猪IL-18在酵母中表达及活性检测

• 作者: 曹素芳 祁画丽
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 猪 白细胞介素18 毕赤酵母 生物活性
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 32-35
• 页数: 4页
• 分类号: S852.61
• 语种: 中文

摘要

以pGEMT/pIL-18为模板,应用PCR法扩增出猪IL-18基因,用EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切后,插入酵母表达载体pPICZαA中,经酶切、PCR扩增及序列测定,成功构建了酵母重组表达载体pPICZ/pIL-18,电击转化毕赤酵母X-33,应用Zeocin筛选获得高拷贝重组转化菌株,甲醇诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析重组pIL-18蛋白的表达,并用SephadexG200纯化表达的重组pIL-18蛋白.运用MTT法检测其生物学活性.试验结果表明,重组X-33酵母菌株能够表达分泌性pIL-18,诱导72 h表达量最高,其表达量占总蛋白表达量的38％.而且纯化的重组pIL-18蛋白具有明显促进淋巴细胞增殖的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹素芳		26	92	6.0	8.0
2	祁画丽		8	9	2.0	2.0