猪IL-18基因原核表达载体的构建及表达

• 作者: 唐满华 唐秀英 朱文冠 李琳 温纳相 程含波 裴仉福 陈瑞爱
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 白细胞介素18 基因克隆 原核表达 猪
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 73-77
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6|Q781
• 字数: 3439字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2006.10.018

摘要

以含新兴猪IL-18基因的真核质粒pcDNA3.1-pIL18为模板,扩增出新兴猪IL-18基因,将其定向克隆至原核表达载体pET32c和pET41c的SacⅠ和KpnⅠ位点,构建了原核表达载体pET32c-pIL18和pET41c-pIL18.经酶切和PCR鉴定,表明所构建的重组质粒为特异性新兴猪IL-18基因原核表达质粒.将该重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)细胞,筛选的阳性菌落经SDS-PAGE分析及Western-blotting分析,表明成功构建了表达重组猪IL-18的大肠埃希菌基因工程菌株.蛋白的可溶性分析表明,重组蛋白呈不可溶表达,在菌体内以不溶性的包涵体形式存在.