RhoA蛋白对结核杆菌侵袭A549细胞的影响

• 作者: 周洪昌 张慧 徐伯赢 薛利军 邵圣文
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 结核杆菌 侵袭 RhoA基因 A549细胞
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1610-1614
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2013.11.0216

摘要

探讨结核杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)侵袭A549细胞过程中RhoA蛋白功能.构建靶向RhoA基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体si-RhoA,转染A549细胞,36 h后进行MTB黏附和侵袭细胞实验,蛋白印迹法(Western blot)检测RhoA蛋白表达水平,电镜观察细胞超微结构改变,激光共聚焦显微镜观察细胞微丝骨架变化并计算F-actin重排指数,定量PCR法测量细胞黏附和内吞的MTB数量.结果显示,si-RhoA转染A549细胞后,RhoA蛋白表达下降84.7％,细胞对MTB的黏附能力未改变.MTB侵袭细胞实验显示,si-RhoA转染组细胞F-actin重排指数和内吞细菌数量分别是(63.0±3.1)％和(3.19±0.26)×103拷贝,无关siRNA组分别是(84.5±1.8)％和(4.45±0.29)×103拷贝,前者均少于后者(P＜0.01).由此可见,结核杆菌侵袭A549细胞需要RhoA蛋白参与,可能通过“拉链”机制介导结核杆菌侵袭非吞噬细胞.