鸭维甲酸诱导基因Ⅰ克隆及其结构域功能分析

• 作者: 吴宁昭 张扬 徐琪 李欣钰 甄霆 陈国宏 陈阳 黄正洋
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 鸭 RIG-Ⅰ基因 克隆 RLR通路
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 2094-2102
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.10.015

摘要

[目的]克隆鸭维甲酸诱导基因Ⅰ (retinoic acid inducible gene Ⅰ,RIG-Ⅰ),分析其不同结构域的功能.[方法]根据GenBank上公布的鸭RIG-Ⅰ序列设计引物,利用RT-PCR克隆鸭RIG-Ⅰ基因CDS (coding sequence)区,根据保守结构域预测结果,构建携带6*his组氨酸标签的不同结构域缺失突变体的真核表载体(RIG-Ⅰ-Full、RIG-Ⅰ-N和RIG-Ⅰ-C),转染鸡胚成纤维细胞DF1,经RT-PCR、间接免疫荧光方法鉴定重组质粒在细胞中转录与表达;同时,利用RT-qPCR检测RLR抗病毒信号通路中的IFN-β、Mx1和PKR等下游基因的表达变化.[结果]鸭RIG-Ⅰ基因CDS区全长2802 bp,共编码933个氨基酸；不同结构域缺失突变体的真核表载体转染DF1细胞后,重组蛋白均在DF1细胞中表达；RT-qPCR结果显示,N端能显著激活RLR通路上IFN-β、Mx1及PKR基因的表达上调.[结论]duRIG-Ⅰ及不同区段均能在DF1细胞中表达,其中N端在调节RLR抗病毒信号通路下游基因的表达过程中发挥了重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈国宏	扬州大学动物科学与技术学院	393	3876	28.0	46.0
2	徐琪	扬州大学动物科学与技术学院	178	1010	15.0	26.0
3	陈阳	扬州大学动物科学与技术学院	52	137	6.0	9.0
4	张扬	扬州大学动物科学与技术学院	59	219	7.0	13.0
5	李欣钰	江西农业大学动物科学技术学院	6	35	4.0	5.0
6	吴宁昭	扬州大学动物科学与技术学院	5	17	3.0	4.0
7	黄正洋	扬州大学动物科学与技术学院	10	36	4.0	5.0
8	甄霆	扬州大学动物科学与技术学院	4	9	2.0	3.0