中国林蛙核糖核酸酶Rdrlec新基因的原核可溶表达

• 作者: 尹雪薇 李丹 蒋丹 赵伟 陶凤云
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 中国林蛙 Rdrlec 原核可溶表达 核糖核酸酶活性
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 27-32
• 分类号: Q819
• 语种: 中文

摘要

来源于蛙属的核糖核酸酶由于具有显著的抗肿瘤活性而备受关注,Rdrlec是从中国林蛙基因组中克隆得到的核糖核酸酶新基因.获得大量高纯度野生型重组蛋白是研究其功能的基础.按照大肠杆菌偏好的密码子人工合成Rdrlec基因,通过EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ位点插入到表达载体pET-32a(+)中构建pET32-Rdrlec重组表达质粒,转化到Escherichia coli BL21(DE3)中,0.4 mmol/L IPTG 30℃诱导6h后,融合蛋白主要以可溶形式表达,经过Ni-NTA亲和纯化和Sephadex G75层析纯化,得到电泳纯融合蛋白.肠激酶切割后得到Rdrlec野生型重组蛋白,具有降解RNA的酶活性,证明分子的空间结构已经正确形成.Rdrlec野生型重组蛋白表达成功,为后续蛋白结构与功能的研究以及进一步的开发应用提供了原料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵伟	北京联合大学生物化学工程学院	29	103	7.0	9.0
2	陶凤云	北京联合大学生物化学工程学院	22	239	10.0	15.0
3	李丹	北京联合大学生物化学工程学院	7	10	2.0	2.0
4	蒋丹	北京联合大学生物化学工程学院	16	43	3.0	6.0
5	尹雪薇	北京联合大学生物化学工程学院	2	3	1.0	1.0