新疆野生盘羊ISG15基因的克隆表达

• 作者: 刘恺 姜方配 孙延鸣 崔茹鹏 杨文 沈文 鲁海富
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 野生盘羊 ISG15 克隆表达 活性检测
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1023-1029
• 页数: 7页
• 分类号: S826|S813.3
• 字数: 5089字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2013.07.005

摘要

本研究旨在克隆表达新疆野生盘羊ISG15基因,并对其表达产物的活性进行检测.首先,利用RT-PCR和RACE技术克隆盘羊ISG15基因的cDNA全长序列,再将ISG15基因克隆至真核表达载体pPIC9K,经电击转化至GS115中并用甲醇进行诱导表达,用Ni2+螯合亲和层析法对表达的蛋白进行纯化,最后通过淋巴细胞转化试验来检测表达蛋白的活性.结果表明:克隆得到的新疆野生盘羊ISG15基因cDNA全长为642 bp,开放阅读框为474 bp,编码157个氨基酸.经酵母重组菌株GS115/pPIC9 K-ISG15表达,SDS-PAGE结果显示表达的蛋白约为33 ku,表达的蛋白可用Ni2+螯合亲和层析方法纯化,淋巴细胞增殖试验结果显示,表达的ISG15蛋白能够显著地刺激淋巴细胞增殖(P＜0.05),表明表达的蛋白具有生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙延鸣	石河子大学动物科技学院	70	257	8.0	12.0
2	杨文	石河子大学动物科技学院	10	35	3.0	5.0
3	沈文	石河子大学动物科技学院	33	105	5.0	8.0
4	崔茹鹏	石河子大学动物科技学院	7	31	3.0	5.0
5	鲁海富	石河子大学动物科技学院	14	79	5.0	8.0
6	姜方配	石河子大学动物科技学院	7	28	3.0	5.0
7	刘恺		2	2	1.0	1.0