Ag85A DNA疫苗加强免疫显著提高卡介苗初免小鼠的抗结核T细胞免疫应答

• 作者: 吴福明 康涵 沈芳 范小勇 袁琴
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 结核分枝杆菌 DNA疫苗 卡介苗 免疫保护 加强免疫 多功能T细胞
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 结核病专题
• 页码范围: 66-72
• 页数: 7页
• 字数: 5726字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2013.01.015

摘要

目的 构建表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)免疫优势抗原Ag85A的DNA疫苗,分析其加强免疫后提高卡介苗(BCG)初免小鼠的抗结核T细胞免疫应答.方法 以Mtb毒株H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增Ag85A抗原编码的结构基因并克隆至真核表达载体pVAX1中构建其DNA疫苗；接着,将纯化后的该DNA疫苗加强免疫BCG初免小鼠2针,以BCG和DNA单独免疫小鼠为对照,免疫8周后无菌分离脾淋巴细胞,分别应用IFN-γ ELISPOT和多因子胞内流式细胞术(intracellular staining)分析免疫小鼠的Mtb抗原特异性效应细胞免疫水平与分泌IFN-γ/TNF-α/IL-2的多功能CD4+T细胞频率及其强度以及CD8+T细胞免疫应答.结果 与BCG免疫及DNA单独免疫组相比,Ag85A DNA加强免疫不仅能显著提高小鼠IFN-γ+TNF-α+IL-2+多功能T细胞,IFN-γ+IL-2+、IL-2+TNF-α+双功能T细胞与IL-2+单功能T细胞的频率以及IL-2的分泌能力,还能显著诱导小鼠产生更多分泌IFN-γ和IL-2的CD8+T细胞.结论 本研究成功构建了表达Mtb免疫优势抗原Ag85A的DNA疫苗并分析了其免疫原性,证实了BCG初免-DNA加强的免疫策略可同时显著增强实验小鼠的Mtb抗原特异性CD4+T和CD8+T细胞应答水平,有利于提高BCG的免疫原性,为增强BCG逐渐下降的抗结核保护效果提供新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈芳	复旦大学附属上海市公共卫生临床中心	19	25	2.0	4.0
2	袁琴	复旦大学附属上海市公共卫生临床中心	1	1	1.0	1.0
3	吴福明		1	1	1.0	1.0