长期低剂量甲醛染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE部分癌症相关基因启动子区甲基化的影响

• 作者: 刘庆成 刘建军 吴德生 周丽 张文娟 杨淋清 胡恭华 黄新凤 龚春梅
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甲醛 亚甲基四氢叶酸还原酶基因 成对盒基因 DNA甲基化
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 335-340
• 页数: 6页
• 分类号: R996
• 字数: 3671字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2013.03.005

摘要

目的 探讨低剂量甲醛长期染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE癌症相关基因启动子区甲基化水平的影响.方法 16HBE细胞每周染毒甲醛10μmol·L-1 24 h,连续24周,分别于染毒3,6,9,12,15,18,21和24周提取RNA或DNA,应用DNA甲基化相关酶消化结合荧光定量PCR的方法观察24个癌症相关基因启动子区甲基化水平的变化；应用荧光定量PCR的方法观察染毒对亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)和成对盒基因(PAX5)基因表达的时间-效应关系.结果 与正常对照组16HBE细胞相比,甲醛染毒细胞4个基因甲基化水平显著改变,2个基因甲基化程度升高,2个基因甲基化程度降低；而在阳性对照人非小细胞癌上皮细胞A549细胞中有9个基因甲基化水平发生显著变化,其中3个基因甲基化水平升高,6个基因甲基化水平降低；甲醛染毒16HBE细胞和A549细胞MTHFR基因均发生高甲基化改变,PAX5基因均出现低甲基化改变.与正常对照组相比,甲醛染毒24周的细胞中,MTHFR基因启动子区甲基化水平升高,非甲基化DNA含量降低58.2％,而PAX5基因启动子区甲基化水平降低,非甲基化DNA含量升高27.1％；随着甲醛染毒时间延长,MTHFR基因表达逐渐降低,而PAX5基因表达逐渐升高.结论 低剂量甲醛长期染毒可以使MTHFR基因和PAX5基因启动子区甲基化水平异常,进而引起基因表达水平改变.