小RNA干扰细胞周期蛋白Y基因表达对喉癌Hep-2细胞增殖的影响

• 作者: 于振坤 周维国 李爱东 肖潇 邰隽 陈晓红 饶远生 黄志刚 黄育北
• 来源期刊: 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 关键词: 细胞周期蛋白类 喉肿瘤 细胞系,肿瘤 RNA,小分子干扰 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 短篇论著
• 页码范围: 761-764
• 页数: 4页
• 字数: 3318字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-0860.2013.09.013

摘要

目的 利用RNA干扰技术下调细胞周期蛋白Y(Cyclin Y,CCNY)基因的表达,观察其对喉癌Hep-2细胞增殖的影响.方法 构建针对CCNY基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,包装慢病毒感染喉癌Hep-2细胞.将细胞分为2组,对照组和实验组(感染CCNY shRNA慢病毒组).运用Real-time PCR检测CCNY在RNA水平的变化；四甲基偶氮唑蓝法和平板克隆形成实验检测CCNY表达下调对细胞增殖的影响.结果 成功包装表达CCNYshRNA的慢病毒并感染Hep-2细胞,shRNA下调CCNY的表达后,与对照组相比CCNY在mRNA水平的表达显著下降,抑制率为75.3％ (P ＜0.05).表达CCNY shRNA的慢病毒感染5d后,继续培养6d,细胞的生长明显受到抑制(P ＜0.001).细胞在体外培养10 d后形成克隆的潜力降低了60％.结论 靶向CCNY基因RNA干扰能够阻抑喉癌Hep-2细胞的CCNY表达,抑制细胞增殖,CCNY基因有望成为喉癌基因治疗靶点.