不同胶原酶消化对原代成骨细胞获得率及活性的比较

• 作者: 丁道芳 李玲慧 杜国庆 王辉昊 詹红生
• 来源期刊: 中国骨伤
• 关键词: 成骨细胞 原代培养 胶原酶类 大鼠
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 328-331
• 页数: 4页
• 字数: 3523字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-0034.2013.04.016

摘要

目的:比较Ⅰ、Ⅱ型胶原酶对新生大鼠颅盖骨的消化效果,选择效率较高的胶原酶,为日后从细胞水平研究中药治疗骨质疏松症的机制提供大量种子细胞.方法:新生24 h SD大鼠10只,雌雄不限,脱颈处死后取出颅盖骨,剪成约1 mm×1 mm的碎片,采用胰酶预消化15 min后将骨片按重量平分成两等份,随机分为Ⅰ型组、Ⅱ型组,分别用0.1％Ⅰ型、0.1％Ⅱ型胶原酶37℃消化1h×2次,所得细胞置于5％CO2培养箱中37 ℃恒温培养.原代细胞分别于培养0h、72 h时采用血球计数板进行计数,第2代细胞于培养48 h后采用NBT/BCIP染色液进行染色,并通过对硝基苯磷酸盐法(PNPP)进行ALP定量检测.结果:镜下观察所获得的细胞形态不规则,细胞计数显示Ⅰ型组细胞数量大于Ⅱ型组；ALP染色为阳性；PNPP法测得两组吸光度均值分别为0.427和0.262,Ⅰ型组显著高于Ⅱ型组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:两种胶原酶均适用于成骨细胞的原代消化,但采用Ⅰ型胶原酶获得的细胞数量更多、活性更好,可为日后骨质疏松症的机制研究提供优质的种子细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	詹红生	上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心	217	2142	25.0	37.0
2	王辉昊	上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心	28	242	9.0	15.0
3	李玲慧	上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心	10	77	5.0	8.0
4	杜国庆	上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心	14	78	5.0	8.0
5	丁道芳	上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心	17	74	6.0	8.0