肺炎克雷伯菌基因无痕敲除方法的建立

• 作者: 冯甜 周冬生 李迎丽 杨瑞馥 邱景富 高钰双
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 克雷伯菌,肺炎 cAMP受体蛋白 基因敲除 自杀载体 同源重组
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 431-434
• 页数: 4页
• 分类号: R378.1
• 字数: 3354字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2013.06.010

摘要

目的 建立可行的肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)基因无痕敲除方法.方法 PCR扩增得到目的基因上下游同源臂融合片段,将其克隆到自杀载体pKO3-km,构建重组质粒.提取重组质粒,通过电转化转入肺炎克雷伯菌NTUH-K2044中,在43℃条件下培养筛选得到重组质粒整合到细菌基因组上的重组子,再利用质粒pKO3-km上的sacB基因在含蔗糖的平板上反向筛选得到突变株.结果与结论 成功构建突变株,且突变株基因组上没有任何抗性筛选标记残留.该研究为肺炎克雷伯菌基因功能研究提供了基因敲除技术.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨瑞馥	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	180	1706	21.0	33.0
2	周冬生	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	36	288	10.0	15.0
3	冯甜	重庆医科大学公共卫生与管理学院	2	15	2.0	2.0
4	李迎丽	重庆医科大学公共卫生与管理学院	19	77	5.0	8.0
5	邱景富	重庆医科大学公共卫生与管理学院	38	269	8.0	15.0
6	高钰双	重庆医科大学公共卫生与管理学院	1	8	1.0	1.0