豆梨铵转运蛋白基因PcAMT1-1和PcAMT1-2的克隆与功能鉴定

• 作者: 丛郁 杨顺瑛 苏彦华 郝东利 金曼
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 豆梨 铵转运蛋白基因 克隆 表达特点 功能互补
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 果树
• 页码范围: 2115-2126
• 分类号: S661.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0513-353X.2013.11.002

摘要

为探明豆梨(Pyrus calleryana Dcne.)铵转运蛋白基因家族成员的序列特征、生理功能和表达特点,以豆梨幼苗为材料,运用电子克隆与3'-RACE技术获得2个铵转运蛋白基因PcAMT1-1和PcAMT1-2,采用酵母互补和半定量RT-PCR方法研究它们的生理功能与表达特点.结果表明:PcAMT1-1和PcAMT1-2开放阅读框为1 518 bp和1 515 bp,编码的蛋白分别含505和504个氨基酸残基.PcAMT1-1和PcAMT1-2分别与甜橙×枳后代CpAMT (ABI52423)和茶CsAMT1;2 (AB114913)的同源性最高(81.96％和78.31％).PcAMT1-1和PcAMT1-2转入酵母均能使铵转运体缺失突变菌株31019b恢复NH4+吸收能力,在酸性条件下(pH 4.8或5.8)PcAMT1-1和PcAMT1-2对31019b的互补效果均优于中性条件(pH 6.8).NH4+有毒类似物MeA+可以显著抑制转PcAMT1-1酵母31019b的生长,该物质对转PcAMT1-2酵母31019b无抑制效果;谷氨酰胺合成酶抑制剂MSX可有效抑制PcAMT1-2对酵母31019b的互补效果,对PcAMT1-1的互补效果无显著影响.正常供铵,PcAMT1-1主要在叶中表达,PcAMT1-2主要在根中表达;无氮处理后,PcAMT1-1和PcAMT1-2在根中的表达先上调后下降;重新供铵后,它们的表达量恢复;地上部的表达对上述处理无显著响应.综上所述,PcAMT1-1和PcAMT1-2在豆梨中具有吸收或转运NH4+的功能,并可能具备不同的调控机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金曼	中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室	9	47	4.0	6.0
2	苏彦华	中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室	11	24	3.0	4.0
3	丛郁	中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室	10	90	5.0	9.0
4	杨顺瑛	中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室	5	12	3.0	3.0
5	郝东利	中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室	5	10	2.0	3.0