原核表达番鸭呼肠孤病毒σC与σB蛋白对雏番鸭的免疫保护

• 作者: 吴宝成 吴异健 吴晓平 韩典霖 黄一帆
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 番鸭呼肠孤病毒 σC与σB蛋白 免疫保护
• 年，卷（期）: 2013,（14）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·资源昆虫
• 页码范围: 3040-3045
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.14.020

摘要

[目的]探讨原核表达的番鸭呼肠孤病毒(DRV)外壳蛋白σC与σB对于雏番鸭的免疫保护作用,为研制有效的DRV亚单位疫苗提供理论基础.[方法]对pET-30a-S3/BL21重组菌与pET-30a-S40RF2/BL21重组菌进行稳定性检验,表达的重组蛋白进行纯化和复性后,进行油乳剂制备,50只1日龄雏番鸭随机平均分为5组,即DRV σB蛋白免疫组、DRV σC蛋白免疫组、DRV σB+σC蛋白免疫组及PBS对照组和攻毒对照组,免疫组皮下接种剂量为500 μg/只,7日龄时进行二次免疫,14日龄时进行攻毒试验,ELISA和琼扩(AGP)检测抗体水平并计算保护指数.[结果]重组菌具有良好的稳定性,各免疫组的雏番鸭均在第2次免疫后7d产生了一定效价的抗体,其中DRV σB+σC蛋白免疫组和DRV σC蛋白免疫组的雏番鸭血清抗体ELISA效价均为1∶200,高于DRVσB蛋白免疫组的1∶100.攻毒保护试验结果表明,联合免疫的保护指数最高,可达70,重组DRV σC保护指数次之,为60,重组DRV σB蛋白保护指数最低,仅为40.[结论]使用原核表达的DRV外壳蛋白σC与σB制备油乳剂,联合免疫可诱导雏番鸭快速产生一定效价的抗体,并提供良好的免疫保护力.