微小RNA-1慢病毒载体介导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的研究

• 作者: 张婉 张玉崚 彭景添 文通 曾俊义 王梦洪 邓海燕 郑泽琪 魏云峰
• 来源期刊: 中华老年心脑血管病杂志
• 关键词: 微RNAs 慢病毒属 间质干细胞 转染 肌钙蛋白I
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 514-520
• 页数: 7页
• 字数: 6630字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0126.2013.05.020

摘要

目的 通过微小RNA-1(microRNA-1,miR-1)慢病毒载体转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSC),探讨miR-1对MSC向心肌细胞分化的影响.方法 采用全骨髓贴壁培养法分离培养大鼠MSC并进行流式细胞学鉴定;构建表达miR-1慢病毒载体;将miR-1慢病毒载体转染大鼠MSC(MSCmiR-1)连续培养15 d,光镜下观察转染后细胞形态,分别于0、4、6、15 d qRT-PCR检测miR-1、心肌相关基因锌指结构蛋白(GATA-4)、肌钙蛋白I(cTnI)、α肌动蛋白(α-actin)的表达;免疫荧光观察cTnI的表达;Western blot检测α-actin的表达.结果 原代大鼠MSC呈长梭形、漩涡状生长,流式细胞学检测显示,98%以上细胞表达CD44和CD29,不足1%细胞表达CD45;成功构建miR-1重组慢病毒载体,病毒滴度为3×108 TU/μl;转导miR-1后,MSCmiR-1高表达心肌特异性相关基因GATA-4、α-actin、cTnI,并随时间逐渐增强,转染4 d免疫荧光检测可见cTnI在部分MSCmiR-1中表达,于15 d时表达最强,Western blot进一步证实了α-actin在MSCmiR-1中表达.结论 转导miR-1至大鼠MSC中可促使其向心肌样细胞的分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭景添	南昌大学第一附属医院心血管内科	65	199	7.0	10.0
2	王梦洪	南昌大学第一附属医院心血管内科	94	394	9.0	14.0
3	郑泽琪	南昌大学第一附属医院心血管内科	68	281	8.0	12.0
4	魏云峰	南昌大学第一附属医院心血管内科	24	111	6.0	10.0
5	文通	南昌大学第一附属医院心血管内科	6	40	3.0	6.0
6	邓海燕	南昌大学第一附属医院心血管内科	3	19	2.0	3.0
7	曾俊义		1	6	1.0	1.0
8	张婉		1	6	1.0	1.0
9	张玉崚		1	6	1.0	1.0