干扰Wrap53基因调控人骨肉瘤U2OS细胞放射敏感性实验研究

• 作者: 刘少平 吴传高 周福祥 竺炎 谢丛华 邱惠
• 来源期刊: 中华肿瘤防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Wrap53 RNAi wtp53 放射敏感性 细胞周期
• 年，卷（期）: 2013,（21）
• 所属期刊栏目: 实验研究/论著
• 页码范围: 1657-1660
• 分类号: R738.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5269.2013.21.008

摘要

目的:探讨干扰Wrap53基因表达对肿瘤细胞放射敏感性的作用及其分子机制.方法:构建针对Wrap53的干扰质粒;脂质体转染法转染至p53野生型(wtp53)的人骨肉瘤U2OS细胞;RT-PCR和蛋白质印迹法检测Wrap53和wtp53基因的mRNA和蛋白表达;克隆形成实验测定放射敏感性参数;流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析细胞周期变化.结果:Wrap53的特异性shRNA质粒转染U2OS细胞后,细胞内Wrap53和wtp53的mRNA和蛋白表达水平均受到明显抑制;Wrap53基因干扰组U2OS细胞的D0值为0.44±0.01,明显高于阴性对照组0.37±0.01,P=0.001,Wrap53基因干扰组SF2值为0.72±0.10,高于阴性对照组0.44±0.02,P=0.047;Wrap53干扰细胞在放射后16 h(P=0.014)和24 h(P=0.011)的G2/M期阻滞更加明显,显著高于对照组;但Wrap53干扰细胞在放射后出现G1期阻滞减少,以放射后24 h最为显著,P=0.001.结论:干扰Wrap53基因表达降低了U2OS细胞的放射线敏感性,该作用可能与下调wtp53表达和诱导细胞放射后G2/M期阻滞有关.