人巨细胞病毒UL141编码蛋白相互作用蛋白的筛选和分析

• 作者: 任高伟 卢志涛 孙峥嵘 崔鑫 王桂丽 阮强 马艳萍 齐莹
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 UL141蛋白 酵母双杂交系统 人胎脑cDNA文库
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 865-868,872
• 页数: 5页
• 分类号: R373
• 字数: 3981字
• 语种: 中文

摘要

目的 应用酵母双杂交技术筛选人胎脑cDNA文库中与人巨细胞病毒(HCMV) UL141编码蛋白相互作用的蛋白,以进一步研究HCMV UL141的生物学功能,为揭示HCMV先天感染机制奠定基础.方法 采用PCR技术扩增HCMV UL141基因片段,将其插入到pGBKT7载体中,构建成诱饵质粒pGBKT7-UL141.然后将pGBKT7-UL141转化到酵母感受态细胞AH109中,于一缺培养基(SD/-Trp)上筛选生长.再将人胎脑cDNA文库质粒转化到含有pGBKT7-UL141质粒的AH109菌株中,在四缺培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)中筛选相互作用的人胎脑cDNA文库蛋白.通过显色反应挑选显蓝色的阳性克隆,提取相应质粒将其转化到大肠杆菌中,并进行回转验证.最后对筛选得到的阳性克隆进行测序及生物信息学分析.结果 诱饵质粒pGBKT7-UL141构建成功.筛选获得6个克隆与HCMV UL141编码蛋白相互作用,其中1个基因编码人类染色质解旋酶DNA结合蛋白3(CHD3).结论 成功应用酵母双杂交系统筛选出与HCMV UL141编码蛋白相互作用的人体组织蛋白—CHD3,提示UL141蛋白可能与病毒的免疫逃避,干扰正常细胞的生长、分化相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马艳萍	中国医科大学附属盛京医院病毒研究室	25	29	3.0	4.0
2	阮强	中国医科大学附属盛京医院病毒研究室	48	227	7.0	14.0
3	齐莹	中国医科大学附属盛京医院病毒研究室	32	45	4.0	6.0
4	崔鑫	中国医科大学附属盛京医院病毒研究室	8	20	3.0	4.0
5	任高伟	中国医科大学附属盛京医院病毒研究室	5	7	2.0	2.0
6	王桂丽	中国医科大学附属盛京医院病毒研究室	3	9	2.0	3.0
7	卢志涛	中国医科大学附属盛京医院病毒研究室	1	1	1.0	1.0