鸭源新城疫病毒NP蛋白的原核表达与间接ELISA方法的建立

• 作者: 刁有祥 国纪垒 张坤 杨建朋 程彦丽 肖坡
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭源NDV NP蛋白 原核表达 ELISA
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 24-28
• 分类号: S852.657
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank发表的鸭源新城疫病毒SDWF02株NP基因序列,设计并合成1对特异性引物,扩增出鸭源新城疫病毒的NP基因,与原核表达载体pET-28a构建重组质粒pET28a-NP,经鉴定后转化Rosetta感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE和Western-blot分析表明,54 000的融合蛋白得以表达,该蛋白能与鸭源新城疫的阳性血清发生特异性的反应.以纯化的重组蛋白为包被抗原,建立检测鸭源新城疫抗体的间接ELISA方法,经方阵滴定确定最佳包被质量液为pH9.6的碳酸盐缓冲液,最佳包被质量浓度为10 ng/孔,血清最佳稀释度为1∶1 000.经应用试验表明该方法具有良好的特异性、可重复性和敏感性,为临床检测鸭源新城疫抗体水平提供了一种简单、准确、快速的诊断方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刁有祥	山东农业大学动物科技学院	182	1328	18.0	28.0
2	张坤	山东农业大学动物科技学院	25	161	8.0	12.0
3	杨建朋	山东农业大学动物科技学院	5	48	3.0	5.0
4	肖坡	山东农业大学动物科技学院	6	21	3.0	4.0
5	程彦丽	山东农业大学动物科技学院	9	59	4.0	7.0
6	国纪垒	山东农业大学动物科技学院	6	55	4.0	6.0