鸭肠炎病毒NP蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

• 作者: 代淑燕 刘忠伟 周碧君 文明 李敏 陈彦希
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭肠炎病毒 核衣壳蛋白 原核表达 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 3412字
• 语种: 中文

摘要

设计一对特异性引物扩增出鸭肠炎病毒(DEV)核衣壳蛋白(NP)基因,并将其定向插入到原核表达载体pET32a上,构建了NP基因的原核表达载体pET-NP;将重组载体pET-NP转化表达宿主菌BL21后,经SDS-PAGE分离后行Western blot显示.获得的表达产物具有良好的免疫原性;应用His.Bind亲和层析柱纯化重组NP蛋白,并以此作为包被抗原.初步建立了检测鸭肠炎病毒抗体的iNP-ELISA;经方阵滴定确定,重组蛋白抗原的最佳包被浓度为5.0μg/L,血清最佳稀释度为1:80,阳性判定标准为:待检血清OD405值≥1.2,且待检血清OD405和阴性血清OD405的比值≥2.0;应用iNP-ELISA对450份鸭血清样本进行检测,结果iNP-ELISA与全病毒包被的iDEV-ELISA符合率达90.9%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周碧君	贵州大学动物科学学院	218	1054	13.0	22.0
2	文明	贵州大学动物科学学院	219	646	10.0	14.0
3	刘忠伟	贵州大学生命科学学院	23	137	7.0	11.0
4	陈彦希	贵州大学动物科学学院	22	60	4.0	5.0
5	李敏	贵州大学动物科学学院	54	119	6.0	10.0
6	代淑燕	贵州大学动物科学学院	5	24	3.0	4.0