丝状支原体山羊亚种脂蛋白LPPA基因的定点突变及原核表达

• 作者: 张爱荣 张玲 徐春光 郝永清 黄海碧
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 丝状支原体山羊亚种 LPPA 定点突变 表达
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 74-76
• 页数: 3页
• 分类号: S852.6
• 字数: 1983字
• 语种: 中文

摘要

采用PCR的方法扩增出丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma mycoides subsp.capriclonum,Mmc)模式株PG3的脂蛋白LPPA基因并对其反应原性进行了研究.该基因中含有1个密码子TGA,在支原体中编码色氨酸,却在原核表达系统中作为终止密码子,因此结合定点突变的方法将LPPA基因序列中TGA同义突变为TGG,并构建重组表达质粒pET-LPPA,然后将其转入宿主菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达产物经SDS-PAGE检测,在64 ku处出现目的条带,将重组蛋白纯化后经Western blot分析,重组蛋白能与Mmc模式株PG3兔高免血清发生特异性反应,具有良好的反应原性.