丝状支原体山羊亚种特异性蛋白基因Mmc-3740的克隆表达和免疫原性分析

• 作者: 张靖鹏 林裕胜 江锦秀 游伟 胡奇林
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 丝状支原体山羊亚种 特异基因 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 1124-1128
• 页数: 5页
• 分类号: S852.62
• 字数: 3333字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.10.002

摘要

[目的]构建表达丝状支原体山羊亚种特异性蛋白基因Mmc-3740的重组表达菌,为Mmc-3740蛋白的进一步研究与应用奠定基础.[方法]采用PCR技术从Mmc-47中扩增出该基因,进行克隆、测序,将克隆质粒与pET-28a分别双酶切,回收正确的片段进行连接构建重组表达质粒,转化至表达菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,产物用SDS-PAGE 检测,用镍柱对其纯化后免疫小鼠获得高免血清,并进行Western-blot验证.[结果]成功构建了克隆和表达载体,重组菌表达目的蛋白大小约21 ku.表达产物通过镍柱纯化后可得到单一的目的蛋白条带, Western-blot检测结果显示所表达的目的蛋白有较好的免疫原性.[结论]成功在BL21(DE3)宿主菌内表达了Mmc-3740重组蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡奇林	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	57	410	11.0	17.0
2	林裕胜	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	40	164	8.0	11.0
3	江锦秀	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	30	100	5.0	8.0
4	张靖鹏	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	18	29	3.0	4.0
5	游伟	福建省农业科学院畜牧兽医研究所	27	76	5.0	7.0